碱性磷酸酶来源于牛肠粘膜，Phosphatase, Alkaline from bovine intestinal mucosa；≥2,000 DEA units/mg protein

这种酶是一种糖蛋白，含约 12% 的碳水化合物（6% 己糖和 6% 其他中性糖）。每个碱性磷酸酶分子含有四个锌原子和四个二硫键。[1]在镁存在的情况下，碱性磷酸酶活性达到最大。[2]对磷酸对硝基苯基磷酸酯、磷酸苯酯、磷酸酚酞、α-甘油磷酸酯、β-甘油磷酸酯、2-磷酸甘油酯、磷酸丙糖酯、葡萄糖-6-磷酸、葡萄糖 1-磷酸、果糖 1-磷酸、果糖 6-磷酸、腺苷 5-磷酸腺苷 3-磷酸、磷酸烯醇丙酮酸和 β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸等磷酸单酯的水解进行催化。[3][4] [5] 砷酸盐、半胱氨酸、碘、无机磷酸盐、焦磷酸盐、磷酸二异丙酯、三苯基磷酸盐、氟磷酸二异丙酯和 L-苯丙氨酸是碱性磷酸酶的一些强抑制剂。[3][6][7]

 

Sigma 酶已用于测定磷脂酰肌醇-4-磷酸盐和磷脂酰肌醇-4,5-二磷酸。[8]它也被用于使用 氟磺酸^™修饰电极的碱性磷酸酶检测。[9]

推荐用于抗体和蛋白质缀合的高比活性等级。

碱性磷酸酶可用于酪蛋白和其他蛋白质的去磷酸化。碱性磷酸酶还可用于 DNA 或 RNA 的 5′-末端的去磷酸化，以防止自我连接。经碱性磷酸酶的去磷酸化作用后，DNA 或 RNA 还可被放射性标记磷酸盐标记（通过 T4 多核苷酸激酶）。

碱性磷酸酶用于偶联抗体和其他蛋白，用于 ELISA、免疫印迹和组织化学检测。常规用于去磷酸化蛋白质，如酪蛋白和核酸。需要高灵敏度时可用于蛋白标记。也可用碱性磷酸酶对 5′-防止自身连接的 DNA 或 RNA 的末端。用碱性磷酸酶去磷酸化后，也可用放射性标记的磷酸盐（通过 T4 多核苷酸激酶）标记 DNA 或 RNA。产物 P5521 已用于研究 GTP 水解 [10]。

 

来自牛肠粘膜的碱性磷酸酶在 pH 7.5-9.5 范围内最稳定。这种酶对醇、胺、焦磷酸和酚的磷酸酯有广泛的特异性，它需要锌、镁或钙的二价离子来具有活性。

该酶对醇类、胺类、焦磷酸盐以及酚类的磷酸酯具有广泛的特异性。常用于蛋白质和核酸的去磷酸化。

 

牛肠碱性磷酸酶为二聚膜衍生糖蛋白。至少存在三种同工酶，每个单体通常拥有两个 N-连接多糖和一个或多个 O-连接多糖。2 该酶需要锌以及镁或钙二价离子才能显示活性。

牛肠道碱性磷酸酶是一种二聚化的膜衍生糖蛋白。其存在至少三种异构体，每个单体通常具有两个N-连接的和一个或多个O-连接的聚糖。

 

在pH 9.8,37℃条件下，一个DEA单位可每分钟水解1 μmole的4-硝基苯基磷酸酯。（一个甘氨酸单位相当于~3个DEA单位）

 

溶于 3.2 M 硫酸铵、1 mM MgCl ₂ 和 0.1 mM ZnCl ₂ (pH 7.0)

 

亲和纯化

本品由牛肠黏膜制备而成。应在 10 mM Tris-HCl (pH 8.0)、1-5 mM 氯化镁、0.1-0.2 mM 氯化锌和 50% 甘油中进行稀释，并在 2-8°C 下储存。[11]

 

包装规格取决于 DEA 单位

由缩二脲测定的蛋白质。

 

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