sevenspikes.themes.common.filters
sevenspikes.themes.common.closemenu

YFP抗体标签亲和纯化填料 [黄色荧光蛋白],Anti-YFP Affinity Beads 4FF

Anti-YFP Affinity Beads 4FF可以富集和纯化YFP及其融合表达蛋白,此外还能结合和纯化GFP和EGFP标签蛋白,不结合BFP以及RFP标签蛋白。
制造商品牌: BSZH 科学公司
货号(SKU): SA075
增值税发票 √ 免费送货 √ 订货电话:010-68689484
$985.88

1.产品介绍

荧光蛋白被广泛应用于检测基因表达效率以及目的蛋白的表达和分布。YFP(Yellow Fluorescent Protein)即黄色荧光蛋白,是绿色荧光蛋白(GFP)的一种突变体,其荧光向红色光谱偏移,主要是因为GFP蛋白第203位苏氨酸被酪氨酸取代,从而发出波长较长的黄色荧光。荧光蛋白作为标签,其融合目的蛋白自发荧光,不需要目的基因的抗体或杂交就能知道目的基因在细胞中的定位,受其它物质干扰小。Anti-YFP Affinity Beads 4FF可以富集和纯化YFP及其融合表达蛋白,此外还能结合和纯化GFP和EGFP标签蛋白,不结合BFP以及RFP标签蛋白。

表1. Anti-YFP Affinity Beads 4FF产品性能

 

指标

性能

基质

高度交联的4%琼脂糖微球

配体

Anti-YFP Antibody

载量

>1mg YFP标签蛋白/ml 介质

粒径 (μm)

45-165

最大耐受压力

0.3 MPa, 3 bar

试剂耐受

Stable up to 80°C, 1mM DTT, 3M Guanidinium•HCl, 8M Urea, 2M NaCl, 2% Nonidet P40 Substitute, 1% SDS, 1% Triton X-100

储存缓冲液

0.02% NaN3, 1×PBS

储存温度

2°C - 8°C

 

2. 问题及解决方案

问题

原因分析

推荐解决方案

流穿中有目的蛋白

填料过载

减少上样体积或增加填料体积。

结合时间太短

延长样品和填料的结合时间。正常高浓度YFP(1mg/ml)需要30min才能达到饱和,样品浓度低时可延长至1小时以上或4度过夜。

标签未暴露

可以加入低浓度的变性剂,上样前透析。

溶液中试剂不兼容

样品上样前进行透析。

洗脱组分中没有目的蛋白

目的蛋白不稳定

使用新配制的样品。

低温操作。

细胞裂解液中加入蛋白酶抑制剂。

YFP空间构象

Anti-YFP Affinity Beads 4FF和YFP的结合,强烈依赖YFP的空间构像,影响YFP构象的缓冲条件会影响两者之间的结合。

YFP种类不同

绿色荧光蛋白有很多种,Anti-YFP Affinity Beads 4FF确定结合来自于管水母的野生型YFP以及GFP、EGFP等,不结合CFP和其他种属GFP。

样品中无标签融合蛋白

纯化前用荧光或WB检测是否有YFP标签融合蛋白。

目的蛋白表达量太低

优化蛋白表达量。

增加上样量。

减少NaCl浓度。

 

背景太杂

非特异性吸附

减少上样量,增加盐浓度。

洗杂不充分

保证充分悬浮,填料需要完全吹打散开,洗涤残留液需要尽量去除干净,增加洗杂次数,每次清洗孵育5-10min。

增加洗杂液中盐离子浓度,使用超级核酸酶去除核酸影响。

 

洗脱后污染

填料用酸洗脱后,将洗脱液转移至新管中,再进行检测,可有效降低背景。

 

3. 订购信息及相关产品

名称

货号

规格

Anti-DYKDDDDK Affinity Beads

SA042001

1ml

SA042005

5ml

Anti-HA Affinity Beads

SA068001

1ml

SA068005

5ml

Anti-c-Myc Affinity Beads

SA065001

1ml

SA065005

5ml

Anti-GFP Affinity Beads 4FF

SA070001

1ml

SA070005

5ml

Anti-YFP Affinity Beads 4FF

SA075001

1ml

SA075005

5ml

Anti-RFP Affinity Beads 4FF

SA072001

1ml

SA072005

5ml

商品规格
属性名称属性值
储存温度 Storage temp.2-8°C冷藏
全球实时库存 Availability √美国St. Louis ≥ 33 | 欧洲Eur. ≥ 27 | 東京Tokyo ≥ 9 | 香港与北京 ≥ 16