Schneider昆虫培养基，Schneider′s Insect Medium；With L-glutamine, without calcium chloride and sodium bicarbonate, powder, suitable for insect cell culture

许多昆虫组织培养基被配制成模拟特定昆虫体液的主要物理化学性质。粗略地调查一下为昆虫组织设计的培养基配方，就会发现成分在质量和数量上有很大的差异。为同一物种设计的不同培养基可能比为不同种类的昆虫设计的两种培养基表现出更少的相似性。我们已经为果蝇细胞和组织的体外培养设计了各种培养基。最广泛使用的是施耐德& # 8242；培养基和Echalier and Ohanessian′s D-22培养基。果蝇细胞已被用于研究多种生物学过程，包括遗传学、内分泌学、生理学和细胞生物学以及重组蛋白表达。

 

当补充5-20%热灭活胎牛血清时，已经发现施耐德& # 8242；培养基支持来源于黑腹果蝇的原代和成熟细胞培养物的快速生长。该培养基已用于施耐德最初从果蝇胚胎中获得的细胞系的生长和维持，以及培养来自其他双翅目物种的细胞。

施耐德昆虫培养基是Sigma提供的细胞培养基之一。营养培养基的选择受1]细胞类型、2]培养物类型[单层、悬浮、克隆]和3]必要的化学定义的强烈影响。请务必查阅文献，以获得关于特定细胞系所需培养基、补充剂和生理参数的建议。

原为果蝇培养而开发；也适用于其他双翅类细胞系的培养。

 

粉末状介质极易吸湿，应防止大气潮湿。每个包装的全部内容应在打开后立即使用。不建议制备培养基浓缩液，因为可能会形成沉淀。

可以在过滤前添加补充剂，或者以无菌方式引入无菌培养基。补充剂的性质可能会影响介质的储存条件和保质期。

1.测量最终所需水量的80%。水温应为15-20℃
2.在轻轻搅拌水的同时，加入粉状介质。搅拌直至分散。材料不会完全溶解。不要加热水。
3.用少量水冲洗原包装，去除所有粉末痕迹。在步骤2中添加到溶液中。
4.向步骤3中的溶液中，为每升制备的最终体积培养基添加0.4 g碳酸氢钠或5.3毫升碳酸氢钠溶液[7.5% w/v]。搅拌直至溶解。
5.搅拌时，用氢氧化钠将溶液的酸碱度调节到至少9.2±0.2。搅拌至少10分钟。溶液可能会变混浊。
6.搅拌时，用盐酸将溶液的酸碱度调至6.7±0.2，溶液会变清。
7.制备氯化钙溶液，将0.6 g无水氯化钙[C5670]溶解在50毫升组织培养级水中，每升最终体积的培养基制备一次。缓慢滴加氯化钙溶液到培养基中，快速混合，避免沉淀形成。
8.搅拌时，将培养基的酸碱度调节至低于所需酸碱度的0.1-0.3个单位，因为它可能在过滤过程中上升。建议使用1N盐酸或1N氢氧化钠。
9.继续加水，使溶液达到最终体积。
10.渗透压为360毫摩尔5%溶液适合来自黑腹果蝇的细胞生长。如果需要，渗透压可以增加10 mOsm，每升最终制备的培养基中加入氯化钾（0.4 g盐或2ml 20%（w/v）溶液）或氯化钠（0.3 g盐或2ml 15%（w/v）溶液）。每制备一升最终体积的培养基，通过加入27.8毫升水，渗透压可降低10 mOsm。搅拌直至溶解。
11.使用孔隙率为0.22微米或更小的膜过滤，立即灭菌。
12.无菌地将培养基分配到无菌容器中。