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RFP抗体标签亲和纯化填料 [红色荧光蛋白]，Anti-RFP Affinity Beads 4FF

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红色荧光蛋白免疫亲和专用填料，红色荧光蛋白（Red Fluorecent Protein，RFP）是从海葵中分离得到的一种分子标记，常用于研究蛋白质的定位、报告基因表达和蛋白-蛋白质相互作用。

制造商品牌: BSZH 科学公司

货号（SKU）: SA072

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5mL [+$2,086.22]

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1. 产品介绍

红色荧光蛋白（Red Fluorecent Protein，RFP）是从海葵中分离得到的一种分子标记，常用于研究蛋白质的定位、报告基因表达和蛋白-蛋白质相互作用。Anti-RFP Affinity Beads 4FF 是一种偶联了抗RFP抗体的琼脂糖填料，可以用于天然RFP、RFP突变体及其融合蛋白的免疫沉淀、免疫共沉淀、亲和层析等实验。本产品具有以下特点：1）使用的抗体和RFP之间具有极高的亲和力, 可以高效捕获裂解上清中的RFP标签蛋白；2）免疫沉淀后，SDS-PAGE检测，背景更干净，更有利于鉴定蛋白相互作用。3）琼脂糖基材具有非特异性吸附低，兼容性好的特点，每毫升载量大于1mg(最高可达到5mg/ml RFP结合载量)，可以用于RFP融合蛋白的大量纯化。此外，我们还提供磁性琼脂糖基材的Anti-RFP Affinity Magarose Beads、高聚物基材的Anti-RFP Affinity Magpoly Beads，可以方便的用于磁性分离。

表1. Anti-RFP Affinity Beads 4FF产品性能

指标	性能
基质	高度交联的4%琼脂糖微球
配体	Anti-RFP Antibody
载量	>1mg RFP标签蛋白/ml 介质
粒径 (μm)	45-165
最大流速	0.3 MPa, 3 bar
试剂耐受(注意：不影响单链抗体的活性，但是可能影响RFP蛋白的构象)	Stable up to 80°C, 1mM DTT, 3M Guanidinium•HCl, 8M Urea, 2M NaCl, 2% Nonidet P40 Substitute, 1% SDS, 1% Triton X-100
储存缓冲液	0.02%叠氮化钠，1XPBS
储存温度	2°C - 8°C

2.问题及解决方案

问题	原因分析	推荐解决方案
洗脱组分中没有目的蛋白	种属不同	并不是每一种RFP蛋白都可以结合Anti-RFP Affinity Beads，本产品确定结合Tag-RFP、turbo-RFP、DsRed、mRFP 、 mCherry 、 mOrange、mPlum、mRuby、mKate2、mRFPruby。
	样品中无标签融合蛋白	纯化前Western检测是否有RFP标签融合蛋白
	空间构象改变	Anti-RFP Affinity Beads对于RFP 的结合，强烈依赖于RFP的空间构象，影响RFP构象的缓冲条件会影响Beads和RFP之间的结合。
副孔样品差异较大	细胞转染和样品制备差异	通常样品制备以后，需要进行蛋白浓度定量，各正副孔上样量需要一致。
副孔样品差异较大	填料损失	填料在洗涤过程中有损失，琼脂糖填料离心后，每次移液需要注意不要吸走填料。最后一次洗涤以后，如果有液体残留，不同样品之间需要留有相同体积的残液。降低操作误差。
背景高	洗涤不充分，洗杂液残留	填料需要轻轻吹打分散开。可以考虑用SDS-PAGE的上样针，插入Beads中，尽量移走残液。最后一次洗杂更换新离心管。
背景高	核酸影响	样品裂解时候，如果核酸过多，可能造成大量非特异性吸附，此时推荐使用本公司的超级核酸酶促进样品处理。同时也要注意，高速离心以后，转移样品不要将沉淀的细胞碎片转移。
结合效率低	孵育时间过短	在高浓度的RFP蛋白溶液中（1mg/ml）,至少需要30分钟，填料才可以达到饱和。样品浓度低时建议延长时间至1小时以上或4℃过夜。
	填料粒径大，空间位阻影响结合	选择粒径更小的磁珠Anti-RFP Affinity Magpoly Beads（1μm），磁珠和RFP的结合速度可以大大提高，洗涤的时间也可以缩短。

3.订购信息及相关产品

名称	货号	规格
Anti-DYKDDDDK Affinity Beads	SA042001	1ml
Anti-DYKDDDDK Affinity Beads	SA042005	5ml
Anti-HA Affinity Beads	SA068001	1ml
Anti-HA Affinity Beads	SA068005	5ml
Anti-c-Myc Affinity Beads	SA065001	1ml
Anti-c-Myc Affinity Beads	SA065005	5ml
Anti-GFP Affinity Beads 4FF	SA070001	1ml
Anti-GFP Affinity Beads 4FF	SA070005	5ml
Anti-YFP Affinity Beads 4FF	SA075001	1ml
Anti-YFP Affinity Beads 4FF	SA075005	5ml
Anti-RFP Affinity Beads 4FF	SA072001	1ml
Anti-RFP Affinity Beads 4FF	SA072005	5ml

商品规格

属性名称	属性值
储存温度 Storage temp.	2-8°C冷藏
全球实时库存 Availability √	美国St. Louis ≥ 33 \| 欧洲Eur. ≥ 27 \| 東京Tokyo ≥ 9 \| 香港与北京 ≥ 16

RFP抗体标签亲和纯化填料 [红色荧光蛋白]，Anti-RFP Affinity Beads 4FF

表1. Anti-RFP Affinity Beads 4FF产品性能

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