MyC抗体标签亲和纯化填料，Anti-c-Myc Affinity Beads

指标

性能

基质

4%琼脂糖微球

配体

Anti-c-Myc鼠单克隆抗体

载量

>1mg c-Myc标签蛋白/ml 介质

粒径 (μm)

45-165

最大压力

0.1 MPa, 1 bar

储存缓冲液

0.02%叠氮化钠，1XPBS

储存温度

2°C - 8°C

问题

原因分析

推荐解决方案

流穿中有目的蛋白

填料过载

减少上样体积或增加填料体积。

结合时间太短

延长样品和填料的结合时间，可过夜孵育。

标签未暴露

可以加入低浓度的变性剂，上样前透析。

溶液中试剂不兼容

样品上样前进行透析。

洗脱组分中没有目的蛋白

目的蛋白不稳定

使用新鲜样品。

低温操作。

细胞裂解液中加入蛋白酶抑制剂。

目的蛋白表达量太低

优化蛋白表达量。

增加上样量，减少缓冲液中NaCl浓度。

样品中无标签融合蛋白

纯化前Western检测是否有c-myc标签蛋白

背景太高

非特异性吸附

最后一次洗杂后，填料转到新的管子里再洗脱或IP。

洗杂不充分

增加洗杂次数，每次清洗孵育5-10min。

增加洗杂液中盐离子浓度。