MBP标签亲和纯化填料 [麦芽糖结合蛋白]，Dextrin Beads

性能

指标

基质

4%琼脂糖微球

配体

糊精

载量（/ml 介质）

>20 mg MBP蛋白(80 kDa)

粒径 (μm)

45-165

最大流速

0.1 MPa, 1 bar

pH 稳定范围

3-12

储存缓冲液

含20% 乙醇的1XPBS

储存温度

2°C -8°C

问题

原因分析

推荐解决方案

柱子反压过高 

填料被堵塞

按照第3部分进行树脂清洗。

裂解液中含有微小的固体颗粒，建议上柱前使用滤膜 (0.22或 0.45μm) 过滤，或者离心去除。

目的蛋白没有吸附

目的蛋白未表达

确保目的蛋白表达

样品或缓冲液中存在一些干扰因素如非离子去污剂

样品透析或用结合液稀释

细胞产生大量的淀粉酶影响结合力

培养基中添加葡萄糖，抑制淀粉酶的表达

融合蛋白使麦芽糖结合位点阻塞或扭曲，影响了目的蛋白的结合力

更换载体

柱子结合时间太短

将样品与Dextrin Beads振荡孵育4度2小时或更长时间

洗脱样品较杂

目的蛋白降解

加一些蛋白酶抑制剂，如PMSF、EDTA等

平衡/洗杂不充分

增加平衡液体积，确保树脂充分平衡/洗杂，如树脂太脏按照第3部分进行树脂清洗。