胰蛋白酶-EDTA溶液，Trypsin-EDTA solution；1 ×, sterile; sterile-filtered, BioReagent, suitable for cell culture, 0.5 g porcine trypsin and 0.2 g EDTA • 4Na per liter of Hanks′ Balanced Salt Solution with phenol red

本品的典型用途是使贴壁细胞从培养表面脱落。 使细胞解离所需的胰蛋白酶浓度主要取决于细胞类型和培养物代数。

 

胰蛋白酶可切割赖氨酸和精氨酸残基的C末端肽段。 如果酸性残基位于切割位点的任意一侧，则该反应的水解速度减慢，并且如果脯氨酸残基位于切割位点的羧基侧，则水解停止。 胰蛋白酶活性的最佳pH条件为7-9。 胰蛋白酶还可以切割氨基酸合成衍生物的酯和酰胺键。 将EDTA添加到胰蛋白酶溶液中作为螯合剂，用于中和钙离子和镁离子以防止其抑制胰蛋白酶活性。 去除这些离子会增加酶活性。

丝氨酸蛋白酶抑制剂（包括DFP、TLCK、APMSF、AEBSEF和抑肽酶等）会抑制胰蛋白酶。

 

胰蛋白酶是由含223个氨基酸残基的单链多肽组成的，它通过切割胰蛋白酶原的Lys-1le肽键以去除N-末端六肽而获得。 氨基酸序列通过6个二硫键交联。 这是天然形式的胰蛋白酶——β-胰蛋白酶。 β-胰蛋白酶可以自溶，在Lys-Ser残基处断裂，产生α-胰蛋白酶。 胰蛋白酶是丝氨酸蛋白酶家族的成员。

 

本品应置于-10至-40°C环境冷冻储存。避免反复冻融。

 

本产品含有酚红。 由于在干冰上运输，包装中可能累积大量二氧化碳。 这些CO₂可能会进入溶液并略微降低pH值，使溶液呈橙色而不是粉红色。 橙色溶液仍然可以使用，或者可以用氢氧化钠调节pH。 使用高浓度胰蛋白酶长时间孵育细胞，会破坏细胞膜并杀死细胞。 溶解胰蛋白酶或稀释浓缩胰蛋白酶溶液时，应使用不含Ca²⁺ 或Mg²⁺的缓冲盐溶液。