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镍金属螯合亲和填料 [His标签蛋白],Ni Smart Beads 6FF

Ni Smart Beads 6FF是一种新型IMAC填料,螯合有非常牢固的Ni离子。超级耐受各种化学试剂,可以用于含有高浓度还原剂,螯合剂的蛋白环境,特别适用于酵母发酵纯化体系。
制造商品牌: BSZH 科学公司
货号(SKU): SA036
增值税发票 √ 免费送货 √ 订货电话:010-68689484
$353.39

1. 产品介绍

Ni Smart Beads 6FF是一种新型IMAC填料,螯合有非常牢固的Ni离子,具体性能见表1。Ni Smart Beads 6FF主要应用于分泌到真核培养液上清中的组氨酸标记蛋白的捕获和纯化,可以在含有EDTA及DTT的情况下进行目的蛋白高效的纯化。Ni Smart Beads 6FF有很强的组分兼容性,适用于广泛底物及盐浓度的缓冲条件,试剂耐受情况见表2。

表1. Ni Smart Beads 6FF产品性能

 

Ni Smart Beads 6FF

基质

高度交联的6%琼脂糖微球

载量(/mL基质)

>10mg 6XHis-tagged protein

微球粒径(μm)

45–165

最大压力

0.3 MPa, 3 bar

储存缓冲液

含20% 乙醇的1XPBS

储存温度

4°C-30°C

表2. Ni Smart Beads 6FF试剂耐受情况

试剂种类

 

0.01M HCl ,0.01M NaOH

一周

10mM EDTA,1M NaOH, 5mM DTT, 5mM TCEP, 20mM 巯基乙醇, 6M盐酸胍

24小时

500mM 咪唑,100mM EDTA

2小时

 

30%异丙醇

20分钟

 

2. 问题及解决方案

问题

原因分析

推荐解决方案

柱子反压过高

填料被堵塞

裂解液中含有微小的固体颗粒,建议上柱前使用滤膜(0.22或0.45μm)过滤,或者离心去除。

洗脱组分中没有目的蛋白

样品中无His标签蛋白

采用Western Blotting等确定样品中是否含有目的蛋白。

表达量太低

优化表达条件。

目的蛋白结合比较弱,在洗杂步骤被洗下来了

提高洗杂液的pH,或者降低咪唑浓度

目的蛋白结合过强,不容易洗脱下来

降低洗脱液的pH值,或者增加洗脱液中咪唑浓度。

蛋白降解

菌体破碎时添加一些蛋白酶抑制剂。

洗脱组分不纯(含有多种蛋白)

洗杂不彻底

增加洗杂液体积或提高洗杂液中咪唑浓度。

样品中含有其他的组氨酸标签蛋白

通过调节pH值,或者咪唑浓度来优化洗杂条件。再使用其他的纯化手段(如离子交换,疏水等)进一步纯化洗脱组分。

上样过程中蛋白发生沉淀

操作温度太低

室温下进行上样。

蛋白发生聚集

在样品和所有的缓冲液中添加稳定剂,如0.1%的Triton X-100 或者Tween-20。

3. 订购信息及相关产品

 

名称

货号

规格

Ni Smart Beads

SA035010

10mL

SA035050

50mL

SA035100

100mL

SA035250

250mL

SA035C

1L

Ni Smart Beads 6FF

SA036010

10mL

SA036050

50mL

SA036100

100mL

SA036500

500mL

SA036C

1L

HisCap Smart 6FF

SA036C11

1X1mL

SA036C51

5x1mL

SA036C15

1X5mL

SA036C55

5X5mL

SA036CS

3X1mL+1X5mL

商品规格
属性名称属性值
储存温度 Storage temp.常温阴凉避光
全球实时库存 Availability √美国St. Louis ≥ 33 | 欧洲Eur. ≥ 27 | 東京Tokyo ≥ 9 | 香港与北京 ≥ 16