重组蛋白G亲和纯化琼脂糖凝胶4FF，rProtein G Beads 4FF

指标

性能

基质

高度交联的4%琼脂糖微球

配体

重组蛋白G

载量

>30mg 人lgG/ml 介质

粒径 (μm)

45-165

最大压力

0.3 MPa, 3 bar

pH 稳定范围

3-10

储存缓冲液

含20% 乙醇的1XPBS

储存温度

2°C - 8°C

种属

亚型

Protein A 结合力

Protein G 结合力

Human

IgA

varible

—

IgD

—

—

IgE

—

—

IgG1

++++

++++

IgG2

++++

++++

IgG3

—

++++

IgG4

++++

++++

IgM

varible

—

Avian egg yolk

IgY

—

—

Cow

++

++++

Dog

++

+

Goat

—

++

Guinea pig

IgG1

++++

++

IgG2

++++

++

Hamster

+

++

Horse

++

++++

Koala

—

+

Liama

—

+

Monkey(rhesus)

++++

++++

Mouse

IgG1

+

++++

IgG2a

++++

++++

IgG2b

+++

+++

IgG3

++

+++

IgM

variable

—

Pig

+++

+++

Rabbit

no distinction

++++

+++

Rat

IgG1

—

+

IgG2a

—

++++

IgG2b

—

++

IgG3

+

++

Sheep

+/-

++

问题

原因分析

推荐解决方案

柱子反压过高 

筛板被堵塞

清洗或更换筛板

填料被堵塞

按照第3部分进行树脂清洗

裂解液中含有微小的固体颗粒，建议上柱前使用滤膜 (0.22或0.45μm) 过滤，或者离心去除。

样品流速过低

样品或缓冲液中有气泡

去除样品或柱子中的气泡

样品和缓冲液进行脱气

洗脱组分中没有目的蛋白

样品中抗体浓度太低

使用其抗原做配体的介质

抗体被降解

适当的提高洗脱pH；

将样品脱盐或透析到合适的Buffer中

样品与Protein G结合能力较弱

更换介质，如rProtein A Beads进行纯化

回收率逐渐减低

上样量太多

减少上样量

柱子太脏，载量降低

按照第3部分进行树脂CIP清洗