1. 产品介绍
rProtein A Beads是用于分离和纯化单克隆抗体、多克隆抗体或Fc-融合蛋白的通用性亲和层析介质,具体性能见表1。Protein A是一种分离自金黄色葡萄球菌的细胞壁蛋白,主要通过Fc片段结合哺乳动物IgG,但是不与狗lgG结合,不结合人lgM、lgD和IgA。蛋白A与蛋白G与不同来源及亚类的免疫球蛋白结合能力不一样,具体见表2。天然Protein A有五个IgG结合区域和一些未知功能的区域,重组protein A去除了与白蛋白及细胞表面结合位点,只含有五个IgG结合区域,减少了非特异性吸附。
指标
性能
基质
4%琼脂糖微球
配体
重组蛋白A
载量
>40mg 人lgG/ml 介质
粒径 (μm)
45-165
最大压力
0.1 MPa, 1 bar
pH 稳定范围
3-10
储存缓冲液
含20%乙醇的1XPBS
储存温度
2°C - 8°C
种属
亚型
Protein A 结合力
Protein G 结合力
Human
IgA
varible
—
IgD
IgE
IgG1
++++
IgG2
IgG3
IgG4
IgM
Avian egg yolk
IgY
Cow
++
Dog
+
Goat
Guinea pig
Hamster
Horse
Koala
Liama
Monkey(rhesus)
Mouse
IgG2a
IgG2b
+++
variable
Pig
Rabbit
no distinction
Rat
Sheep
+/-
++++=结合能力强; ++=结合能力中等; —=结合能力弱或没有结合
2.问题及解决方案
问题
原因分析
推荐解决方案
柱子反压过高
筛板被堵塞
清洗或更换筛板
填料被堵塞
按照第3部分进行树脂清洗
裂解液中含有微小的固体颗粒,建议上柱前使用滤膜 (0.22或0.45μm) 过滤,或者离心去除。
样品纯化过程中曲线不稳
样品或缓冲液中有气泡
去除样品或柱子中的气泡
样品和缓冲液进行脱气
洗脱组分中没有目的蛋白
样品中抗体浓度太低
使用其抗原做配体的介质
抗体被降解
适当的提高洗脱pH
回收率逐渐减低
上样量太多
减少上样量
柱子太脏,载量降低
3.订购信息及相关产品
产品名称
货号
规格
rProtein A Beads
SA012005
5mL
SA012025
25mL
SA012200
200mL
SA012C
1L
AbPur rProtein A Kit
SA012K
3次
rProtein A Beads 4FF
SA015005
SA015025
SA015200
SA015C
AbCap A 4FF
SA015C11
1 X 1mL
SA015C51
5 X 1mL
SA015C15
1 X 5mL
SA015C55
SA015CS
3X1mL+1X5mL