Application
Sigma 公司的丙酮酸激酶已用于制备 大肠杆菌 培养物的 BL21 CP 菌株的无细胞提取物,用于高产无细胞蛋白表达。[4]该酶通过与洗脱的 DAPk(死亡相关蛋白激酶)(一种结合并激活丙酮酸激酶的丝氨酸/苏氨酸激酶)共同孵育,用于测定丙酮酸激酶活性。[2]丙酮酸激酶是一种参与糖酵解和糖异生的酶。产品 P7768 来自家兔肌肉,以甘油缓冲水溶液形式提供,已用于 PGM 酶试验,以测定磷酸甘油酸变位酶活性 [3]。丙酮酸激酶也用于研究丙酮酸激酶 (PK) 缺乏 [1]。
Biochem/physiol Actions
丙酮酸激酶催化磷酸基团从磷酸烯醇丙酮酸 (PEP) 转移到 ADP。这种转移产生一分子丙酮酸盐和一分子 ATP。分子量:237 kDa,以分子量为 57 kDa 的四个等亚基的四聚体形式存在。
最佳 pH 值:~7.5
分子量:237 kDa,以分子量为 57 kDa 的四个等亚基的四聚体形式存在。
等电点:7.6
最佳 pH:~7.5
最佳温度:25°C
εA 280= 0.541 mg (p)/ml,1 cm 路径
在 pH 7.4 和 30°C 的 Tris 缓冲液中,报告的 K M 值为 ATP (0.86 mM)、丙酮酸盐 (10 mM)、ADP (0.3 mM) 和 PEP (0.07 mM)。丙酮酸激酶对磷酸烯醇式丙酮酸具有高度特异性,但可利用其他三磷酸二核苷酸作为底物替代 ATP,包括 GTP、ITP、dATP、UTP 和 CTP。Unit Definition
在 37°C、pH 7.6 条件下,1 个单位将每分钟 1.0 μmol 磷酸(烯醇)丙酮酸转化为丙酮酸。
Physical form
溶于含 0.01 M 磷酸盐的 50% 甘油的溶液,pH 7.0
Analysis Note
缩二脲法测定蛋白